Enterotoxigenic profiles and submerged and interface biofilms in Bacillus cereus group isolates from foods / Perfiles enterotoxigénicos y biopelículas de superficie y sumergidas en aislados del grupo Bacillus cereus de alimentos

Abstract Biofilm formation by Bacillus cereus strains is now recognized as a systematic contaminaron mechanism in foods; the aim of this study was to evaluate the production of submerged and interface biofilms in strains of B. cereus group in different materials, the effect of dex-trose, motility, the presence of genes related to biofilms and the enterotoxigenic profile of the strains. We determine biofilm production by safranin assay, motility on semi-solid medium, toxin gene profiling and genes related to biofilm production by PCR in B. cereus group iso-lated from food. In this study, we observe strains used a higher production of biofilms in PVC; in the BHI broth, no submerged biofilms were found compared to phenol red broth and phenol red broth supplemented with dextrose; no strains with the ces gene were found, the enterotoxin profile was the most common the profile that includes genes for the three enterotoxins. We observed a different distribution of tasA and sipW with the origin of isolation of the strain, being more frequent in the strains isolated from eggshell. The production and type of biofilms are differential according to the type of material and culture medium used.

Resumen La formación de biopelículas por cepas de Bacillus cereus es reconocida como un mecanismo de contaminación sistemática en alimentos; el objetivo del estudio fue evaluar la producción de biopelículas sumergidas y de superficie en cepas del grupo de Bacillus cereus en diferentes materiales, el efecto de la dextrosa, la motilidad, la presencia de genes relacionados a biopelículas y el perfil enterotoxigénico de las cepas. Determinamos la producción de biopelículas por el ensayo de safranina, motilidad en medio sólido, perfil enterotoxigénico y genes relacionados a producción de biopelículas por PCR en aislados del grupo de Bacillus cereus de alimentos. En este estudio, observamos en las cepas utilizadas una alta producción de biopelículas en PVC; en caldo BHI, no se encontraron biopelículas sumergidas en comparación con el caldo rojo de fenol y caldo rojo de fenol suplementando con dextrosa; no se encontraron cepas con el gen ces, el perfil de enterotoxinas más común fue el perfil que incluía los genes de las tres enterotoxinas, también observamos una distribución diferente de tasA y sipW con relación al origen de la cepa, siendo más frecuente estos genes en las cepas aisladas de huevos. La producción y el tipo de biopelículas es diferente de acuerdo con el tipo de material y el medio de cultivo utilizado.

Periodontal disease distribution, risk factors, and importance of primary healthcare in the clinical parameters improvement / Distribución de la enfermedad periodontal, factores de riesgo e importancia de la atención primaria en salud en la mejora de los parámetros clínicos

The objective of this study is to show the distribution of periodontal disease, risk factors, and importance of primary healthcare, for the improvement of clinical parameters. Two phases study transversal and nonrandomized trial (before - after), with educational intervention and conservative treatment, were carried out at Dental School of the Universidad Autónoma de Guerrero México, in 161 subjects who met the inclusion criteria. Oral healthcare education was carried out as well as conservative periodontal treatment, with six months follow up. Clinical measurements were performed with a Williams probe, O'Leary plaque index, calculus index and dental mobility Miller method. Periodontal disease was found on 82 % of all participants. Multinomial logistic regression analysis showed an odds ratio of 14.3 (95 % CI: 2.5, 82.1), 13.4 (95 % CI: 1.7, 103.5), 29.2 (95 % CI: 3.2, 260.9) and 68 (95 % CI: 6.6, 711.0) plaque in gingivitis, mild, moderate and severe chronic periodontitis, respectively. The longitudinal panel data analysis showed a significant effect (p <0.001) in the mean decrease of the clinical parameters after intervention, probing depth 0.4 mm (95 % CI: -0.5, -0.3), pockets depth 1.1 mm (95 % CI: -1.3, -0.9), amount of pockets 4.5 (95 % CI: -5.2, -3.7), bleeding 5.2 (95 % CI: -5.9, -4.5) and dental mobility 0.6 degrees (95 % CI: -0.7, -0.5). Primary healthcare is still the best option to improve the periodontal health in population who do not have access to specialty services. Dentists can achieve significant clinical improvement at very low cost, if they are aware of primary health care.

El objetivo del estudio fue mostrar la distribución de la enfermedad periodontal, los factores de riesgo y la importancia de la atención primaria de salud, para la mejora de los parámetros clínicos. Material y método: Estudio de dos fases transversal y no aleatorizado (antes - después), con intervención educativa y tratamiento conservador, realizado en la Facultad de Odontología de la Universidad Autónoma de Guerrero México, en 161 sujetos que cumplieron con los criterios de inclusión. Se llevó a cabo una educación sanitaria oral, así como un tratamiento periodontal conservador, con un seguimiento de seis meses. Las mediciones clínicas se realizaron con una sonda Williams, el índice de placa O'Leary, el índice de cálculo y el método Miller de movilidad dental. Resultados: se encontró enfermedad periodontal en el 82 % de todos los participantes. El análisis de regresión logística multinomial mostró un odds ratio de 14.3 (IC 95 %: 2.5, 82.1), 13.4 (IC 95 %: 1.7, 103.5), 29.2 (IC 95 %: 3.2, 260.9) y 68 (IC 95 %: 6.6, 711.0) placa en gingivitis, periodontitis crónica leve, moderada y grave, respectivamente. El análisis de datos del panel longitudinal mostró un efecto significativo (p <0.001) en la disminución media de los parámetros clínicos después de la intervención, profundidad de sondeo 0.4 mm (IC 95 %: -0.5, -0.3), profundidad de bolsillos 1.1 mm (IC 95 %: -1.3, -0.9), cantidad de bolsillos 4.5 (IC 95 %: -5.2, -3.7), hemorragia 5.2 (IC 95 %: -5.9, -4.5) y movilidad dental 0.6 grados (IC 95 %: -0.7, - 0.5). Conclusiones: la atención primaria de salud sigue siendo la mejor opción para mejorar la salud periodontal en la población que no tiene acceso a servicios especializados. Relevancia clínica: los dentistas pueden lograr una mejora clínica significativa a un costo muy bajo, si conocen la atención primaria de salud.

Prevalencia de cepas del grupo de Bacillus cereus productoras de biopelicula en helados comercializados en México / Prevalence of strains of the Bacillus cereus group biofilm producers in ice cream in Mexico

El helado es un vehículo para la transmisión de patógenos como Bacillus cereus. Por lo cual, se determinó la frecuencia de cepas del grupo Bacillus cereus en helados, perfil enterotoxigénico, psicrofilia y producción de biopelícula. Un total de 230 muestras de seis marcas de helado de producción y distribución nacional fueron colectadas en México. El análisis microbiológico incluyó aislamiento en agar manitol yema de huevo. Las cepas se identificaron molecularmente a partir de la amplificación del gen de la topoisomerasa (gyrB) y el perfil enterotoxigénico por la amplificación de regiones conservadas de los operones nheABC y hblABD y del gen cytK. Además, se determinó la producción de biopelícula en vidrio y policloruro de vinilo. La frecuencia de contaminación por cepas del grupo B. cereus fue de 3,6%, se encontró una cepa positiva para nheABC y cinco para cytK, el 87,5% de las cepas generó biopelícula en vidrio y todas en policloruro de vinilo, dos cepas fueron psicrofilicas. En conclusión, en el helado distribuido en México, se encontró una baja contaminación por cepas del grupo B. cereus con alta producción de biopelícula; sin embargo, no se debe subestimar el potencial enterotoxigénico de estas cepas

Ice cream is a medium for microbial growth due to its nutritional value and neutral pH. Therefore, the frequency of strains of the Bacillus cereus group in ice cream was determined, the enterotoxigenic profile, psychrophilic strains and biofilm production. A total of 230 samples of six brands of ice cream produced and distributed nationwide were collected in Mexico. The microbiological analysis was a cold pre-enrichment and isolation of the microorganism in egg yolk agar. The strains were identified molecularly from the amplification of the topoisomerase gene (gyrB) and the enterotoxigenic profile by the amplification of conserved regions of the nheABC and hblABD operons and of the cytK gene. In addition, the production of biofilm in glass and polyvinyl chloride and psychophilia was determined. The frequency of contamination by strains of the B. cereus group was 3.6%, a positive strain was found for nheABC and five for cytK, 87.5% of the strains generated biofilm in glass and all in polyvinyl chloride, two strains were psychrophilic. In the ice cream distributed in Mexico, a low contamination by strain of the B. cereus group was found, however, the enterotoxigenic potential of the strains should not be underestimated

PAI-1 haplogenotype confers genetic susceptibility for obesity and hypertriglyceridemia in Mexican children. / Un haplogenotipo de PAI-1 confiere susceptibilidad genética para la obesidad y la hipertrigliceridemia en niños mexicanos

The presence of childhood obesity predisposes to the development of cardio vascular and metabolic diseases, such as coronary artery disease and type 2 diabetes mellitus, in adulthood. The polymorphisms described in PAI-1 gene have been linked with obesity and metabolic syndrome in several populations. The aim of this study was to investigate the as sociation of the -844 G/A (rs2227631), -675 4G/5G (rs1799889) and HindIII C/G (rs757716) PAI-1 polymorphisms with obesity and dyslipidemia in a sample of Mexican children. A cross-sectional study was performed in 222 children with an age range between 6-11 years; 104 children were classified as obese and 118 children with normal-weight. The PAI-1 poly morphisms were analyzed by PCR-RFLP. Linkage disequilibrium (LD) and haplogenotype analysis among the three polymorphisms were determined. The results showed significant as sociations with obesity of the -844 G/A genotype and the A allele (OR= 2.75, p<0.001 and OR= 1.76, p=0.01, respectively). The -844 G/A polymorphism was found in LD with -675 4G/5G PAI-1 polymorphism (D’= 0.77). We found that G-4G-C/A-5G-G is a risk haplogeno type for obesity [OR=2.6; 95% confidence interval (CI) 1.17-4.22; p= 0.01] and with marginal association with hypertriglyceridemia(OR= 2.6; 95% CI 1.04-6.35; p= 0.05). The G-4G-C/A 5G-G PAI-1 haplogenotype may be a genetic marker of susceptibility for obesity and hypertri glyceridemia in Mexican children.

La presencia de la obesidad en la infancia predispone al desarrollo de enfermedades cardiovasculares y metabólicas, como la enfermedad arterial coronaria y la diabetes mellitus tipo 2 en la edad adulta. Algunos polimorfismos en el gen PAI-1 se han relacionado con la obesidad y el síndrome metabólico en varias poblaciones. El objetivo del estudio fue investigar la asociación de los polimorfismos -844 G/A (rs2227631), -675 4G/5G (rs1799889) y HindIII C/G (rs757716) en el gen PAI-1 con la obesidad y las dislipidemias en una muestra de niños mexicanos. Se realizó un estudio transversal en 222 niños con un rango de edad de 6-11 años, de los cuales 104 niños fueron clasificados con obesidad y 118 con peso normal. Los poli morfismos en el gen PAI-1 fueron analizados por PCR-RFLP. También se determinó el desequilibrio de ligamiento y el análisis de haplogenotipos de los tres polimorfismos. Los resultados mostraron la asociación significativa de la obesidad con el genotipo -844 G/A y el alelo A (OR= 2,75, p<0,001 y OR= 1,76, p=0,01, respectivamente). El polimorfismo -844 G/A se encontró en desequilibrio de ligamiento con el -675 4G/5G (D’= 0.77). También se encontró que el haplogenotipo G-4G-C/A-5G-G es un marcador de riesgo para la obesidad [OR=2,6; 95% intervalo de confianza (CI) 1,17-4,22; p= 0,01], además de que este haplogenotipo presentó una asociación marginal con la hipertrigliceridemia (OR= 2,6; 95% CI 1,04-6,35; p= 0,05). El haplogenotipo G-4G-C/A-5G-G en el gen PAI-1 puede ser un marcador genético de susceptibilidad para obesidad e hipertrigliceridemia en niños mexicanos.

Significant associations between C-reactive protein levels, body adiposity distribution and peripheral blood cells in school-age children / Asociaciones significativas entre los niveles de proteína C reactiva, distribución de la adiposidad corporal y células sanguíneas periféricas en niños escolares

Obesity is associated with a state of chronic low-grade inflammation. Generally, there are significant correlations between body mass index and increased C-reactive protein levels. We investigated the relationship of high sensitivity C-reactive protein (hsCRP) levels with body adiposity distribution and blood cell count in obese children. A cross-sectional study was performed in 225 Mexican children. In the study were included 106 obese and 119 normal-weight children, aged 6-13 years old. The body composition was evaluated by BMI, body circumferences and skinfold thickness. hsCRP levels and hematological parameters were analyzed in all children. The hsCRP levels were higher in obese children than in the control group (1.5 and 0.41 mg/L respectively, P<0.001). Interestingly, hsCRP levels >3 mg/L were associated with the increase of circumferences of the waist, hip and arms (ORs= 9.08, 6.78 and 8.73, respectively, P<0.001), and a higher thickness of triceps, subscapular and suprailiac skinfolds (ORs= 4.73, 6.39 and 5.26, respectively, P=0.001), as well as a higher leukocyte and platelet counts. The data suggest that hsCRP levels are associated with skinfold thickness and body circumferences, and a moderate relationship was found with leukocyte and platelet counts in the studied children.

La obesidad se asocia con un estado de inflamación crónica de bajo grado. Generalmente, hay correlaciones significativas entre el índice de masa corporal y el incremento en los niveles de la proteína C reactiva (CRP). Se investigó la relación de los niveles de CRP de alta sensibilidad (hsCRP) con la distribución de la adiposidad corporal y la cuenta de las células sanguíneas en niños obesos. Se realizó un estudio transversal en 225 niños mexicanos. En el estudio se incluyeron 106 niños obesos y 119 con peso normal, edad de 6-13 años. La composición corporal fue evaluada por IMC, circunferencias corporales y grosor de pliegues cutáneos. Los niveles de la hsCRP de alta sensibilidad y los parámetros hematológicos fueron analizados en todos los niños. Los niveles de la hsCRP presentaron un incremento en los niños obesos con respecto al grupo control (1,5 y 0,41 mg/L respectivamente, P<0,001). Es interesante que los niveles de hsCRP>3 mg/L se asociaron con mayor circunferencia de cintura, cadera y brazo (ORs= 9,08, 6,78 y 8,73, respectivamente, P<0,001) y mayor grosor de los pliegues como tríceps, subescapular y suprailiaco (ORs= 4,73, 6,39 y 5,26, respectivamente, P=0,001), así como con el aumento en la cuenta de leucocitos y plaquetas. Los datos sugieren que los niveles de la hsCRP se asocian con el grosor de los pliegues cutáneos y las circunferencias corporales y fue encontrada una relación moderada con las cuentas de leucocitos y plaquetas en los niños estudiados.

Adiposidade corporal, mas não resistência insulínica, associa-se ao polimorfismo -675 4G/5G no gene PAI-1 em uma amostra de crianças mexicanas / Body adiposity but not insulin resistance is associated with -675 4G/5G polymorphism in the PAI-1 gene in a sample of Mexican children

OBJETIVO: Elaboramos este estudo para avaliar se o polimorfismo -675 4G/5G no gene inibidor 1 do ativador do plasminogênio se associa à obesidade e à resistência insulínica em crianças mexicanas. MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal em 174 crianças, 89 delas com peso normal e 85 obesas, variando sua idade de 6 a 13 anos. Todas as crianças eram do estado de Guerrero e foram recrutadas de três escolas primárias na cidade de Chilpancingo, México. Os níveis de insulina foram determinados por prova imunoenzimática. Foi usado o modelo de avaliação da homeostase para determinar resistência insulínica. O polimorfismo -675 4G/5G no gene PAI-1 foi analisado pelo método reação de polimerase em cadeia-polimorfismo no comprimento dos fragmentos de restrição. RESULTADOS: A prevalência de resistência insulínica no grupo obeso foi mais alta (49,41%) do que no grupo com peso normal (16,85%). O polimorfismo 4G/5G do PAI-1 foi encontrado em equilíbrio de Hardy Weinberg. O genótipo 4G/5G contribuiu para um aumento significativo da relação cintura-quadril (β = 0,02, p = 0,006), da circunferência da cintura (β = 4,42, p = 0,009) e da espessura da prega subescapular (β = 1,79, p = 0,04), mas não se relacionou com a resistência insulínica. CONCLUSÃO: O genótipo -675 4G/5G do gene PAI-1 se associou a aumento da adiposidade corporal em crianças mexicanas.

OBJECTIVE: To assess whether the -675 4G/5G polymorphism in the plasminogen activator inhibitor-1 gene is associated with obesity and insulin resistance in Mexican children. METHODS: A cross-sectional study was performed in 174 children, 89 with normal-weight and 85 with obesity, aged from 6 to 13 years. All children were from state of Guerrero, and recruited from three primary schools in the city of Chilpancingo, Mexico. Insulin levels were determined by immunoenzymatic assay. The homeostasis model assessment was used to determine insulin resistance. The -675 4G/5G polymorphism in PAI-1 gene was analyzed by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. RESULTS: The prevalence of insulin resistance in the obese group was higher (49.41%) than in the normal-weight group (16.85%). The 4G/5G PAI-1 polymorphism was found in Hardy Weinberg equilibrium. The 4G/5G genotype contributed to a significant increase in waist-hip ratio (β = 0.02, p = 0.006), waist circumference (β = 4.42, p = 0.009), and subscapular skinfold thickness (β = 1.79, p = 0.04); however, it was not related with insulin resistance. CONCLUSION: The -675 4G/5G genotype of PAI-1 gene was associated with increase of body adiposity in Mexican children.